Cara Membuat Media PDA untuk Kultur Murni Jamur

Pertanianku — Sebelum Anda membuat kultur murni (F0), Anda harus membuat media PDA (Potatoes Dextrose Agar) sebagai media tumbuh. Media tersebut terdiri atas kentang, gula, dan agar-agar. Sebenarnya, Anda bisa mendapatkan media PDA di toko-toko kimia tertentu, tetapi Anda juga bisa meraciknya sendiri karena cara pembuatannya tidak begitu sulit.

media PDA
foto: pertanianku

Agar-agar digunakan karena strukturnya tidak mudah diuraikan, lalu kentang dianggap mengandung nutrisi yang cukup lengkap untuk pertumbuhan miselium jamur. Perpaduan kedua bahan tersebut dapat menghasilkan media yang lebih lama dan stabil bila dibandingkan dengan bahan-bahan lain. Berikut ini cara membuat media PDA.

Bahan-bahan:

  • Kentang 200 gram
  • Dekstrosa 20 gram
  • Tepung agar 20 gram
  • Air aquades 1 liter
  • Kapas secukupnya
  • Aluminium foil/plastik

Peralatan:

  • Tabung reaksi/cawan petri/botol
  • Autoklaf atau panci presto
  • Kompor

Cara membuat:

  • Kupas kentang dan potong-potong kentang dengan ukuran 1 cm × 1 cm × 1 cm, lalu cuci hingga bersih.
  • Rebus kentang dengan air aquades/aqua sebanyak 1 liter selama 15–20 menit hinggga kentang empuk.
  • Saring air kentang hingga bersih. Apabila volume air kentang berkurang, tambahkan lagi menjadi 1 liter. Hanya sari kentang yang digunakan untuk membuat media PDA.
  • Panaskan kembali cairan PDA sambil ditambahkan dekstrosa dan agar-agar secara perlahan hingga terlarut sempurna.
  • Setelah larut, tuang larutan PDA ke dalam tabung reaksi atau wadah yang sudah disiapkan sebanyak ¼ volume tabung.
  • Tutup tabung reaksi dengan kapas, kemudian lapisi dengan aluminium foil atau plastik tahan panas.
  • Masukkan ke presto atau autoklaf.
  • Sterilisasi tabung dengan panci selama 45–60 menit.
  • Setelah itu, keluarkan tabung reaksi dan letakkan dalam posisi miring untuk memperluas area media PDA sehingga pertumbuhan miselum jamur lebih banyak. Usahakan kemiringan tabung dapat membuat media mendekati leher tabung, tapi jangan sampai menyentuh kapas.
  • Diamkan media selama beberapa hari, kemudian amati untuk memastikan media bebas dari kontaminasi. Apabila media bersih, Anda bisa langsung menggunakannya dan diinokulasi dengan bibit jamur.